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微生物培养如何计算酵母菌的数量
(1)根据探究培养液中酵母菌种群数量变化的实验步骤,该同学实验操作中有3处错误,纠正如下:
①应将试管轻轻震荡几次再吸取酵母菌培养液进行计数;
②应将酵母菌培养液放置在适宜温度下培养;
③应连续七天,每天观察、取样计数并记录数据.
(2)为了避免杂菌污染,实验中所用吸管、计数板等器具需进行灭菌处理.
(3)如果一个小方格内酵母菌过多,难以数清,就需要对培养液进行适当的梯度稀释.
(4)根据题意可知,80个小室内共有酵母菌48个,则整个计数室酵母菌数量=48÷80×400=240个,并且酵母菌样品稀释了100,因此上述1ml酵母菌样品中约有菌体=240÷(0.1mm 3 ×10 -3 )×100=2.4×10 8 个.为避免偶然误差,需要多次计数,求平均值.
故答案为:
(1)①应将试管轻轻振荡几次再吸取酵母菌培养液进行计数
②应将酵母菌培养液放置在适宜温度下培养
③应连续七天,每天观察、取样计数并记录数据
(2)灭菌
(3)适当稀释
(4)2.4×10 8 多次计数,求平均值
酵母菌计数为什么×104
酵母菌计数×104是做了研究证实出来的。计数酵母菌的方法:
1、可以用显微镜观察,血球计数法,2mm×2mm方格的计数,2mm×2mm表示计数室的边长,即一个大方格的边长。由于计数室厚度为0.1mm,所以计数区的总体积为0.4mm3。计数室通常也有两种规格:一种是16×25型,即大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格。另一种是25×16型,即大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格。但是不管计数室是哪一种构造,它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成。
2、16×25型的计数公式为:酵母细胞个数/1mL=100个小方格细胞总数/100×100×10000×稀释倍数,25×16型的计数公式为:酵母细胞个数/1mL=80个小方格细胞总数/80×100×10000×稀释倍数。
3、选择的稀释度,做平板计数,选择适宜的稀释度,吸取1mL加入平板,注入孟加拉红培养基,29摄氏度培养5-7天,计数。酵母总数/mL=平板数X稀释倍数。
关于酵母菌的计数
计数应该是用的血球计数板吧。计数板的原理简单说就是,计数室的体积是一定的,当里面充满液体时,可以根据液体的体积和里面细胞的个数算出总数。所以,准确测量的前提是,计数室必须完全充满液体。先滴液、后盖片,操作稍快则会因盖片的拍下而产生气泡,而计数室内液体体积一旦不准确,测总数就会出现误差(偏小)。测面滴液、缓慢渗入的办法则不会产生气泡,计数准确。这样操作也有利于保护计数室的方格线,当然这是次要原因。
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